如何對產品活性進行保持增強和優化
一、開篇
金典廣告說“金典活性乳鐵蛋白”,君樂寶說“鮮活營養”,酸奶廣告中說“活性益生菌”,吳京代言的飛鶴奶粉含“15大活性營養群”,破壁孢子靈芝粉說是活性的,淘寶里有活性葉酸、活性維生素,說活性的產品太多了?!盎钚浴边@個詞,大家幾乎都聽過了,那到底什么是活性、為什么要有活性、怎么保持活性、怎么增強活性、活性的大小能否及如何檢測量化出來?活性對人體健康的好處能否檢測量化出來?
百度百科里有關“活性”的內容不多,說“活性是指具有生命力能夠頑強活躍下去的一種活動性質”,并把“活性”翻譯成activity。百度百科對活性的定義還是“飄”了一些,不夠落地,定義也沒有從技術角度進行溯源和解釋,activity的翻譯嚴格說來也是不準確的。
這里需要善意聲明一下,國內對“活性”暫沒有相關的行標團標及國標,您這里看到的這篇文章很可能是國內難得一見的對活性進行技術及量化討論的文章,也歡迎同行一起討論一起學習。
二、活性概念/生物價值/營養價值
活性activation,是指產品具有一些對人體生理機能及健康提升有幫助、可提升人體自身自愈自護能力,這種生物價值及功能特性,我們稱之為活性。
具有這種生物功能活性的產品即活性產品,其價值也稱之為生物價值,生物價值一般會體現在不同的功能方向上,比如調節生理機能、參與細胞調控、協助細胞通信、運輸信息、提高抗氧化能力、提高免疫力、維護健康、協助預防某方面疾病等等。按國內法律法規這里不允許使用醫藥及保健行業使用的“預防、治療、醫治、保健”等詞,具有生物價值的物質不屬于人體生長發育所必需的七種營養范圍,但在增強人體自愈自護能力方面發揮著重要又關鍵的作用。
與生物價值對應的是營養價值。營養價值就是產品(食物)人體有提供營養的價值,按照常識并參考最新版的《中國居民膳食營養素參考攝入量2023》,人體需要七種營養:水、維生素、礦物質、蛋白質、脂類、碳水化合物、膳食纖維,提供這七種對人體健康有益的合適劑量營養,就是營養價值。
活性產品面向健康亞健康不健康的廣大人群,無毒副作用、無依賴性、無瞑眩反應,對人體是安全的、友好的。
三、從破壁孢子靈芝粉說說活性
破壁孢子靈芝粉,名氣不小,在國內也銷售多年了,破壁,破掉細胞壁,讓更多活性物質盡量多出來,以便人體吸收更多。通常破壁能用低溫就不用高溫,能用物理方法就不用化學方法,生化反應也不用,原因簡單,就是想最大程度不去破壞天然活性物質的結構,保持了其天然結構、架構,就維持了其活性,有了活性,活性物質才能發揮其生物價值的作用,一旦活性破壞了,就可能成為普通營養物質了。
這種方法在國內流行了很多年,這個方法的核心思想體現就是含量或者濃度,含量越高濃度越大,盡量讓人體吸收更多,產生更多的對人體有益的生物價值。實際上,結合前述的觀點,這種破壁提高含量和濃度的做法,只能說出發點是善良的,但不夠科學甚至不科學。國外這些年一直在研究活性的增強優化和量化,優化,就是要增強提高活性,量化,就是對前后的結果是可以量化對比,而且這里還有個功能方向問題,生物活性的功能方向有很多,做活性優化出來的功能方向是不是市場或客戶需要的?
客觀理性的說,在活性優化量化及功能方向研究上,國內外差了不止十幾年。下面舉現實的例子:
ü 香菇多糖在10ug/ml是活性最強,如含量到了500就基本沒有,有個類線性的下降過程;
ü 甲殼素其活性大小與O基的位置密切相關,如在六邊環的2、3位就有活性,如鏈接的是6位,活性就低多了;
ü 茯苓的機構和香菇相似,但后者有活性,前者沒活性,對前者做乙?;瘍灮蠡钚跃痛蟠笤鰪姡踔脸^了后者原有的活性;
ü 硫酸褐藻糖的活性與有無硫酸根密切相關,有硫酸根活性很強,反之無活性,等等。
四、牛奶及乳清蛋白
牛奶是常見飲品,從全乳角度,一般有個13272的劃分,即牛奶中水占87%,固形物(即乳固體)占13%,固形物中27%為蛋白質(73%是乳糖、無機鹽、脂肪球、礦物質、灰分等),蛋白質中20%是乳清蛋白(80%是酪蛋白,即2:8比,母乳中兩者比例是6:4,所以母乳更易消化吸收),這樣算下來乳清蛋白占0.7%。從是否具有活性角度繼續分為兩種,熱穩定和熱不穩定,乳清液在PH4.6左右、時長20分鐘、加熱溫度70-90度,發生沉淀和析出的是熱不穩定的,其他未沉淀未析出的是熱穩定的,熱穩定的約占乳清蛋白質的19%,熱不穩定的就是帶有活性的,沉淀和析出就意味著結構受到了破壞,活性就沒有了,因為溫度破壞了其架構結構,這樣算下來活性部分(即熱不穩定部分)約占0.56%。
乳清蛋白whey protein是乳清中的蛋白,曾經作為廢料進行處理,現在乳清蛋白成了人類健康的好朋友,一直以來國內的乳清蛋白都是進口,這幾年國內稍稍有了些初級的技術生產能力,政府就把乳清蛋白列入出口管制清單了。乳清蛋白通常含有的成分按蛋白由多到少依次是:β-乳球蛋白β-LG、α-乳清蛋白α-LA、免疫球蛋白Ig、牛乳清白蛋白BSA、乳鐵蛋白Lf、乳過氧化物酶LP、糖巨肽GMP、溶菌酶LZ、β-微球蛋白、胰島素樣生長因子IGF、γ-球蛋白等等。
下面是細節的技術參數。
五、保持活性
保持產品的天然架構/結構(natural infrastructure),就保持了產品的原始的、天然的架構/結構,產品就有活性。
活性物質通常是環境敏感的,在物理(含加熱輻射超聲)、化學、酶作用下,容易引起架構結構(含四層)的改變,這將導致活性減弱,這叫變性;活性物質完全沒了,活性徹底失去了,叫失活。
乳清蛋白的組成蛋白在本文里是“載體”,載體是工具,通過載體把載物送進去,載物是標的,載物是我們需要的活性前體,前體是人體產生合成活性物質的主要驅動物,這是個大的邏輯框架。
保持活性,就需要在乳清蛋白的全生命周期里,在所有工藝細節,都能盡量做到保持其天然架構少或者不受到影響和破壞,這些工藝的要求目前列了18條,細節不贅。
六、增強活性
如何增強提高或者說優化產品的活性,這就需要更多具有活性的物質或成分,活性物質通常需要前體來合成,就需要知道誰是前體、有幾個前體、前體在哪里,前體是載物(目標物),載物需要載體,載體是工具,就需要找到合適的載物把載體送進去。這里面需要對產品的組成及技術細節有更專業的了解,還需要了解相關分離技術?;钚栽鰪娨步谢钚詢灮?。
結合前文的分析及邏輯,如何增強活性的線路圖出來了:
ü 載物是要運載傳輸的標的,目標物,target;
ü 載體是運輸傳輸的工具,carrier;
ü 載物通過載體把自己運載傳輸到目的地,這里的目的是細胞內,穿透細胞壁細胞膜送到細胞里面;
ü 兩個GSH前體是載物,半胱氨酸殘基cys(準確說是游離的巰基SH)和谷氨酰半胱氨酸Glu-cys;
ü 載體是我們選的特定蛋白,準確是是乳清蛋白中的組成蛋白,所以在分離出乳清蛋白的基礎上,再分離出后續作為載體的蛋白;兩個載體一個是牛血清白蛋白BSA,66KDa含17個cystine殘基+6個Glu-Cys谷氨醯半胱氨酸,一個是乳鐵蛋白Lf,80KDa含17個cys和4個Glu-Cys;載物要足夠多,載體也要足夠多,實際上因為載物(前體)自身是載體(蛋白)的組成部分,所以數量方面載物和載體之間是直接的線性關系;
ü 載體把載物送到目的地后,載物(gsh兩前體)在酶及三磷酸腺苷ATP的參與下,合成GSH,合成GSH過程中,有gcl(gsh連接酶)和gss(gsh合成酶)的共同參與,gcl首先將gsh的γ位羥基鏈接到半胱氨酸的氨基上,構成gsh的前體----γ-Glu-cys,然后gss再將甘氨酸鏈接到其上,產生gsh。
特別提醒,因為篇幅所限,有關gsh、前體、細胞排毒、抗氧化等方面的更多專業知識,本文不多說了,我司擁有相關的技術及產品,有興趣的朋友請聯系我司,張先生13801169383(同微信),高先生13811327561(同微信)。
七、量化活性
量化活性?;钚蕴岣吡耍趺醋C明呢?最好能檢測、可量化,這樣就更有理有據了。
1)對載物做檢測及量化
SH巰基對于蛋白的功能特性起到決定的作用,其構型也是發揮生物價值的結構基礎,游離的巰基基團就是半胱氨酸殘基,兩個半胱氨酸殘基合成二硫鍵HSSH,SH/SS反應可以交互,即HSSH可釋放出兩個巰基,所以殘基(游離的巰基)是主要的GSH前體,是第一主角。對 二硫鍵數量的檢測是對活性可量化可檢測的重要手段。
傳統的二硫鍵檢測方法包括生化法和結構法。生化法包括二硫鍵還原和酶切等步驟,用于破壞二硫鍵并分析其數量;結構法則利用X射線晶體學、核磁共振等技術手段。近年,發展出了新興的二硫鍵及巰基的檢測手段:質譜法、納米顆粒法、分子探針法。
上述是對載物做檢測并量化二硫鍵及SH巰基、Glu-cys的數量及含量水平,舉個具體檢測方法的例子。比如,通過DTNB(5,5-二巰基雙-2硝基甲苯)與半胱氨酸發生硫醇-二硫化物交換反應,在堿性條件下反應顯黃色,412nm處有強烈吸收峰,該反應可特異地檢查出SH巰基,從而定量檢測半胱氨酸殘基的數量,公式是:umol SH/g=73.53*A412*D/C進行,其中A412是412nm處的吸光值,D稀釋倍數,C蛋白濃度,73.53是系數,細節步驟不贅。
2)對載體做檢測及量化
也可以對載體做檢測及量化,對Lf可用sds-page電泳法做檢測定量,對BSA可用溴甲酚綠法gcg。
3)對生成目標物質GSH做檢測及量化
也可以檢測GSH的含量水平(包括抗氧化總含量TAC),畢竟把載物送進去的目的是為了合成更多的GSH,而GSH提高了,人體的細胞排毒、抗氧化能力就大大提高了,檢測GSH含量水平的方法及工具已經成熟了,比如采用ELISA KIT試劑盒,可對血清、血漿、組織勻漿或相關人體體液樣本做GSH含量的定量檢測,細節不述。
圍繞活性物質具有的生物價值,如何保持活性、增強活性、量化活性,是本文的重點。我們最終增強優化活性就是基于前體多少,而選擇了其中的兩個蛋白,bsa和Lf。
回應開篇,歡迎大家一起參與有關活性的討論,共同推動“活性”相關的技術進步及標準制定,促進“活性”對健康事業有更大的幫助。我公司有活性保持、增強和量化的相關產品,生物功能食品,可免費試用,“先試用再購買,先試用再合作”,歡迎咨詢,張先生13801169383(同微信),高先生13811327561(同微信)。
本文完。